АЕЕА-АЕЕА

Ово једињење носи амино групу и карбоксилну групу на оба краја, што га чини идеалним хетеробифункционалним умрежавачем. Овај дизајн има незаменљиву вредност у АДЦ, ПРОТАЦ и обележавању протеина.
Предности хетеробифункционалног умрежавања: У поређењу са хомобифункционалним умреживачима (са истим функционалним групама на оба краја), хетеробифункционални дизајн омогућава постепено и усмерено спајање два различита молекула, избегавајући формирање мултимера или производа циклизације. Посебно за овај молекул: Прво, карбоксилна група (активирана преко НХС или ХАТУ) може да реагује са молекулом (као што је лизински остатак на антителу) да би формирала амидну везу; затим, амино заштита (ако је пре-заштићена) се уклања и она реагује са другим молекулом (као што је карбоксилна група на леку или флуоресцентној сонди). Ово секвенцијално спајање омогућава прецизну контролу везе 1:1, са приносом који је обично већи од 70%.
Типични сценарији примене: ① Конструкција АДЦ: Повежите активиране карбоксилне групе на површину антитела (преко лизина или пројектованог цистеина), а затим повежите амино групе са карбоксилним или карбонатним групама на лековима (као што су ММАЕ, ДМ1). АЕЕА-АЕЕА служи као размакница, обезбеђујући одговарајућу удаљеност између антитела и лека. ② ПРОТАЦ синтеза: Повежите лиганд Е3 убиквитин лигазе (као што су ВХЛ, ЦРБН лиганди) на карбоксилни крај и прикачите циљни протеински лиганд на амино крај, формирајући ПРОТАЦ молекул дужине (приближно 2,5 нм) који прецизно промовише формирање комплекса. ③ Површинска имобилизација: Причврстите карбоксилне групе на површину амино-модификованих магнетних перли или чипова, при чему се амино крај користи за хватање биомолекула који садрже карбоксил-. ④ Флуоресцентно обележавање: Повежите карбоксилне групе за антитела и повежите амино групе са НХС естаром флуоресцентних боја (као што су ФИТЦ, Ци5) да бисте припремили сонде са двоструком ознаком-.
Поређење са другим линкерима: У поређењу са комерцијално доступним хетеробифункционалним умреживачима као што је Сулфо-СМЦЦ (са НХС естром и малеимидом на оба краја), ПЕГ окосница овог молекула обезбеђује бољу растворљивост у води и биокомпатибилност, избегавајући агрегацију протеина изазвану хидрофобним умреживачима. У исто време, његова прилагодљивост дужине (омогућава причвршћивање више АЕЕА јединица) чини га повољнијим у сценаријима где су потребне дуже одстојне руке. Укратко, бифункционални дизајн терминалних амино и карбоксилних група постиже високу селективност и секвенцијално спајање високог приноса, што је основна вредност овог молекула као везника.